探討ZNF322A致癌蛋白參與肺癌形成與轉移的分子機制(II)

本研究室過去發現致癌性鋅指蛋白(zinc finger protein) ZNF322A會藉由調控下游基因轉錄進而加速癌症發展，我們進一步利用基因轉殖鼠模式發現ZNF322A能加成由Kras誘導的肺腫瘤生成，暗示Kras也許會透過促進ZNF322表現進而加速癌症惡化。本研究室以ZNF322A為主的基因體ChIP-seqencing及RNA-seqencing資料庫分析，發現許多ZNF322A下游基因參與血管新生(angiogenesis)路徑，暗示著ZNF322A會參與腫瘤血管生成。因此本計畫旨在探討 (1) Kras基因突變是否能促進ZNF322A表現以達促癌特性，(2) 並進一步尋找由Kras誘導ZNF322A轉錄活化的可能機制以及ZNF322A參與調控腫瘤血管新生之機制及其轉錄目標基因。 初步研究結果顯示Kras下游轉錄因子陰陽1(Ying Yang 1, YY1) 透過正向調控ZNF322A基因啟動子區域進而上調ZNF322A表現，並促進由ZNF322A介導的癌細胞遷移、癌細胞增生以及周圍人類臍帶血管內皮細胞的遷移。本計畫將繼續於肺癌細胞及動物模式中闡明Kras基因突變促進ZNF322A表現以及促腫瘤血管新生特性（目標1A），並深入探討Kras/YY1藉由正向調控ZNF322A轉錄而促進癌症腫瘤特性的轉錄調控機制（目標1B）。另外，利用冷光啟動子分析、ChIP-qPCR、RT-qPCR及西方墨點法，發現ZNF322A透過正向調控音蝟因子(Sonic hedgehog, Shh) 基因啟動子進而促進Shh表現。本計畫將續以改編程 (reconstitution) 實驗證明ZNF322A透過正向調控Shh其表現以導致腫瘤血管新生的機制（目標2A），並以肺癌病人檢體闡明ZNF322A以及其上游調節因子（YY1、Shh及代表血管新生的標記 CD31）的相關性及預後(prognosis) 指標性（目標2B）。 本研究將以ZNF322A癌症轉錄因子為中心，提供Kras/YY1藉由正向調控ZNF322A轉錄的上游機制；而過度表現的ZNF322A透過正向調控Shh表現以導致腫瘤血管新生為下游機制。預期肺癌病人癌組織中ZNF322A與CD31同時高表現可作為獨立預後危險預測因子，Kras/YY1、ZNF322A/Shh路徑在未來也許是具有潛力的治療目標。