蛋白質工程，表現和表徵T細胞培養基中使用的蛋白質成分和生長因子( I )

T細胞是參與抗腫瘤免疫反應的主要成分。T細胞療法現已與其他療法合併使用，以幫助其他療法無效的癌症或中風患者。包括諾華公司的Kymriah和KITE Pharma的Yescarta在內的嵌合抗原受體T细胞（CAR-T）產品已獲批准，它們在晚期患者中顯示出非常有效的結果，急性淋巴細胞白血病的完全治愈率可高達50％。CAR-T細胞的生產主要涉及六個過程，包括（1）血液分離，（2）濃縮收集,（3）基因修飾,（4）活化和活體外擴增，（5）品質評估（6） 劑型，輸送和給藥。但是,T細胞研究和開發仍未建立成熟的生產過程。許多CAR-T產品都是使用需要高度人工勞力，難以擴展且故障率高的步驟。在我們之前的研究中，我們透過加入雙硫鍵成功表達不穩定蛋白質，並表達人類血清白蛋白，白介素2（IL-2）和纖維黏蛋白（FN）片段，這些蛋白質是CAR-T細胞生產中不可缺乏的成分。特別地，FN片段具有結合T細胞上整合蛋白α4β1和α5β1的位點，和結具有合慢病毒上肝素的位點。它可以透過同時結合T細胞和慢病毒來增強慢病毒介導的基因轉導。在這項研究中，我們將與騰達行企業股份有限公司合作表現，設計和鑑定T細胞培養基中使用的蛋白質成分和生長因子。我們有五個具體目標來工程設計和生產用於T細胞培養基的蛋白質成分和生長因子，它們將:（1）表達蛋白質成分，包括HSA，FN片段，胰島素和轉鐵蛋白，以及生長因子，包括IL-2，IL-4，IL-7，IL-15和IL-21;（2）設計，突變並將雙硫鍵加入到蛋白質成分和生長因子中;（3）表達含有HSA和FN融合蛋白的蛋白質成分和生長因子;（4）大量產生這項研究中表達的蛋白質，並使用質譜和NMR光譜檢測其折疊;（5）與三個實驗室合作，評估這項研究中表達的蛋白質的活性。迄今為止,台灣有60多家生技公司和30多家GTP實驗室在從事細胞治療,它們需要國外昂貴的蛋白質成分和生長因子。我們已經在國立成功大學建立了GLP蛋白質生產實驗室，可以用更便宜的價格提供必要的高質量產品。這項研究的結果將為台灣未來T細胞療法提供必要的基礎設施。