利用去整合蛋白抑制肝癌細胞黏附、遷移及侵犯能力

Abstract

肝臟是富含微血管的器官，當肝臟出現癌化時，癌細胞容易侵犯血管並且轉移，這使得肝癌患者治療後出現復發的機會增加。研究顯示，肝癌細胞藉由大量表現整合蛋白(integrin)，促進細胞轉移、生長及血管新生的癌化作用。整合蛋白是由?及β次單元所形成的穿膜蛋白，它們負責調節細胞間、細胞與細胞外基質的交互作用。肝癌組織中發現，表現?v和β1相關的整合蛋白與癌症惡化有關，這類的整合蛋白可辨識RGD (arginine-glycine-aspartate)氨基酸序列結構，與細胞外基質黏附，誘發胞內外訊息傳遞。臨床實驗發現，抑制整合蛋白所調控的細胞活性可有效抑制癌化作用，而在肝病變的研究也指出，抑制?v和β1相關的整合蛋白可達到三點效果:第一，抑制整合蛋白調控的肝癌細胞黏附、遷移及侵犯能力；第二，抑制整合蛋白?v調控的肝纖維化；第三，抑制整合蛋白?vβ3、?vβ5及?5β1調控的血管新生。在本實驗中，我們試圖針對肝癌細胞表現的整合蛋白，抑制其生理活動。我們使用實驗室所開發的去整合蛋白(disintegrin) Rho、KG、KG-P和ARLDDL抑制肝癌細胞表現的整合蛋白。去整合蛋白源自於蛇毒蛋白，是天然的整合蛋白抑制劑，抑制強度為細胞外基質的1000倍以上，去整合蛋白含有RGD序列結構，利用此結構可與細胞外基質競爭整合蛋白的交互作用。目前已證實，去整合蛋白可抑制黑色素瘤的轉移及生長，同時也減緩腫瘤的血管新生。本實驗顯示，藉由去整合蛋白KG及KG-P針對整合蛋白?vβ3、?vβ5及?5β1，能有效抑制肝癌細胞對於細胞外基質(fibronectin、vitronectin)的黏附能力，其50%抑制濃度(IC50)介於15到80 nM；同時也具有抑制肝癌細胞遷移及侵犯能力，其IC50介於2到400 nM之間；然而單純針對整合蛋白?vβ3的ARLDDL則是較差的抑制效果。這些去整合蛋白對於肝癌細胞活性不具影響力。另外當肝癌細胞表現B型肝炎x蛋白(HBx)時，整合蛋白?vβ3及?5β1的表現量下降1 5倍以及3倍，同時減弱細胞的黏附能力並且增強細胞遷移及侵犯的趨勢，而這使得去整合蛋白無法有效抑制HBx蛋白誘發的細胞遷移能力。本篇證實整合蛋白?vβ3、?vβ5及?5β1參與肝癌細胞黏附、遷移及侵犯能力，且運用去整合蛋白可抑制肝癌細胞中整合蛋白調控的轉移能力，此結論可作為未來發展抑制肝癌轉移的藥物基礎。

Date of Award	2014 Aug 21
Original language	Chinese
Supervisor	Wen-Ya Huang (Supervisor)