小鼠palladin於肌生成時之啟動子與基因表現分析

Abstract

肌動蛋白微絲(actin filament)廣泛存在於各種細胞類型中，參與調控細胞遷移、囊泡運輸、維持細胞形狀、細胞附著與肌肉收縮等運動。目前已知?多微絲結合性蛋白(ABP; Actin-binding protein)會共同調控微絲的組裝與動態，進而影響細胞的機械特性。Palladin是一種微絲關聯蛋白(actin associated protein)，基因名稱為Palld，屬於Palladin/Myotilin/Myopalladin家族，並且目前已知的蛋白質產物主要有三種異構型：200 kDa isoform、140 kDa isoform、90-92 kDa isoform，先前研究指出，此三種異構物在不同組織具有不同的表現分布，而本篇主要探討palladin三種異構物在骨骼肌肉生成與分化時的轉錄調控，與個別的表現量和分布。首先我們利用螢火蟲冷光?系統(luciferase assay)來檢測出可能啟動子區域，並利用PROMO軟體搜尋可能參與調控的轉錄因子。再藉著即時聚合?連鎖反應(real-time PCR)與西方點墨法(Western blotting)，探討Palld gene在RNA與蛋白質階層的表現量，並透過免疫螢光染色技術探討palladin三種異構物在小鼠肌原細胞株(C2C12)中的表現分布位置與其他蛋白質之間的交互關係。透過本篇實驗結果，在palladin於骨骼肌肉細胞發育與分化上所扮演的角色提供了一些重要資訊，但未來還需透過更進一步的研究探討，找出更詳細的調控機制，並釐清palladin三種異構物於肌肉生成過程所扮演的角色。

Date of Award	2015 Feb 9
Original language	Chinese
Supervisor	Hao-Ven Wang (Supervisor)