在實驗室裡將模式生物的特定基因進行突變有助於對該基因的?能做進一步的分析，其中秀麗隱桿線蟲因為其生命週期短、容易培養生長、並且也可作為基因轉殖動物而廣泛應用於?能性遺傳學的研究。數種常用來對線蟲進行基因體編輯的方法包括：化學藥劑、輻射、跳躍轉座子等都可使其基因產生隨機性的突變。較為新穎的基因編輯工具-CRISPR系統可針對指定的目標基因造成DNA雙股螺旋結構斷裂，目前也已經用來產生線蟲的突變株。而要使CRISPR系統能作用於線蟲上通常是以單隻注射的顯微注射法的方式來達成，同樣用來產生線蟲的基因轉殖動物的方法還有微粒子轟擊法。雖然微粒子轟擊法可將質體同時送入多隻線蟲的性腺中，但此方法須使用特定基因突變的蟲株以利於之後的篩選，同時也因此大幅度的延長了整個流程時間。近年來線蟲專用的抗生素篩選系統已有所發展，如果將其與微粒子轟擊法結合，將會大幅縮短篩選的時間。在本研究中我們以CRISPR系統使目標基因的外顯子序列產生突變，成?地產生了unc-119與iglr-2的突變蟲株。為了研究線蟲是否具有模式辨別受器，我們給予iglr-2突變蟲株餵食具有致病性的大腸桿菌，以野生型線蟲作為對照組；實驗結果顯示兩者之間並無顯著差異，推測其原因是此iglr-2突變蟲株是屬於框內缺失突變，對其蛋白質?能表現不具影響；同時我們也成?地結合微粒子轟擊法和抗生素篩選系統，產生出了iglr-2過表現蟲株，同樣給予餵食致病性大腸桿菌，並發現該蟲株比野生型更具有抵抗力。在本研究中我們建立了兩個嶄新的技術平台，希望之後對於iglr-2甚至是其他未知基因的?能性分析能夠有所助益。
| Date of Award | 2014 Aug 21 |
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| Original language | Chinese |
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| Supervisor | Chang-Shi Chen (Supervisor) |
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建立線蟲之iglr-2基因轉殖動物
聰羽, 廖. (Author). 2014 Aug 21
Student thesis: Master's Thesis