探討Aurora-A五端非轉譯區的核醣體結合區之轉譯調控機制

Abstract

實驗室先前的研究發現，大腸直腸癌細胞在EGF刺激之下會透過轉譯調控增加Aurora-A 蛋白的表現(Journal of Cellular and Molecular Medicine 2010; 14(6B): 1520-1531)。本論文進一步去分析Aurora-A 五端非轉譯區(5’untranslated region 5’UTR)的轉譯調控機制。實驗室先前透過RNA immunoprecipitation (RNA- IP)並結合蛋白質體分析，發現RNA結合蛋白hnRNP Q1會結合上Aurora-A mRNA五端非轉譯區，且會增加Aurora-A mRNA 的轉譯能力。透過 in vivo translational assay發現，無論是在Cap-dependent 或是 Cap- independent的核醣體結合區(internal ribosome entry sites IRESs)， hnRNP Q1皆能顯著性的增加Aurora-A mRNA轉譯調控的效率。有趣的是，Aurora-A mRNA五端非轉譯區的IRES轉譯活性是有細胞週期依賴性的，而Cap-dependent的轉譯活性則無此現象。此外，透過建立hnRNP Q1上與Aurora-A mRNA結合位缺失的片段，發現其對於Aurora-A mRNA的轉譯調控能力相對於完整的hnRNP Q1有降低的情形，證明hnRNP Q1與Aurora-A mRNA的結合對於其轉譯調控是必要的。另一方面，hnRNP A2/B1是另一個會與Aurora-A mRNA五端非轉譯區結合的RNA 結合蛋白。實驗結果發現，hnRNP A2/B1對於Aurora-A mRNA的轉譯調控作用是抑制性的，且同樣有調控IRES轉譯活性及細胞週期依賴性的情形。進一步分析Aurora-A mRNA 3’UTR是否有參與其轉譯調控，結果顯示hnRNP Q1對於Aurora-A mRNA 3’UTR沒有影響。綜合以上結果，本研究得知hnRNP Q1和 hnRNPA2/B1是兩個重要的Aurora-A 5’UTRs轉譯調控因子，並且參與具有Aurora-A mRNA IRES的轉譯調控和細胞週期依賴性的表現。

Date of Award	2014 Aug 7
Original language	Chinese
Supervisor	Liang-Yi Hung (Supervisor)