石斑魚神經壞死病毒及虹彩病毒多價重組次單位疫苗之開發

Translated title of the thesis: Development of the multivalent recombinant subunit vaccine of nervous necrosis virus and iridovirus for grouper
  • 江 翰鍇

Student thesis: Master's Thesis

Abstract

神經壞死病毒 (nervous necrosis virus NNV) 與虹彩病毒 (Iridovirus) 對台灣石斑養殖產業造成嚴重損失,本研究主旨為開發能同時對抗兩種病毒之多價重組次單位疫苗。本研究以龍膽石斑為試驗對象,首先建立病毒之攻毒平台,所測定 NNV 之半致死劑量 (median lethal dose LD50) 為 105 2 TCID50/mL;Iridovirus 之 LD50 為 2 76 × 107 5 copies/mL。在疫苗開發部份,篩選可能的 NNV 鞘蛋白 (NNV coat protein NNVCP) 與 Iridovirus 主要外鞘蛋白 (major capsid protein MCP) 作為抗原決定域 (epitope),以 TR-PCR 技術製備重組蛋白作為候選次單位疫苗,並與神經壞死病毒之類病毒顆粒 (NNV-VLPs) 疫苗做比較測試。以 real-time PCR 分析重組次單位疫苗所誘發之免疫相關基因表現,實驗結果發現較偏向Th2 免疫路徑,產生抗體免疫反應。在安全性測試部分,實驗結果顯示重組次單位疫苗對魚體具備高度安全性;在多價次單位疫苗效力測試部分,以 NNV 攻毒後,NNVCP-S5E 混合 IMCP400-8E 組之相對存活率 (relative percent survival RPS) 為 69%;以 Iridovirus 攻毒後之 RPS 為50%。實驗結果顯示多價重組次單位疫苗對魚體具保護作用,可以延緩發病,具較低之得病死亡率。
Date of Award2014 Sep 10
Original languageChinese
SupervisorTzong-Yueh Chen (Supervisor)

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