轉殖似轉錄激活因子蛋白核酸?（TALEN）來改變菸草葉綠體 DNA 序列之研究

Translated title of the thesis: A study to modify tobacco chloroplast DNA sequence by nuclear transformation of transcription activator like effector nuclease (TALEN) gene
  • 蘇 源霖

Student thesis: Master's Thesis

Abstract

在先前研究中，為了修飾葉綠體基因序列，基因轟擊法是最常使用在將表現載體送入葉綠體中，並利用葉綠體之基因組同源重組機制導致基因序列改變，而此方法須經多次之篩選及再生過程可得到穩定之轉殖株，然而，其為耗時且不經濟之方法。為了專一且更方便的進行葉綠體基因修飾，在本研究利用細胞核表現一對帶有葉綠體轉運胜?的 Transcription activator-like effector nuclease (TALEN) ，暫時性或穩定表現，並經由葉綠體的 TOC-TIC 轉運機制運送入葉綠體中，進而辨認葉綠體目標 DNA 序列，造成 DNA 雙股斷裂，利用葉綠體 DNA 之修復機制，預期將造成葉綠體 DNA 缺失或插入。研究結果顯示，將煙草 (Nicotiana tabacum) 暫時表現含有一對重組 TALEN 蛋白後，其 DNA 經 HRM (High resolution melting) 分析，暫時性表現 TALEN 之煙草目標 DNA 序列與對照組有顯著上之差異，表示 TALEN 重組蛋白能在葉綠體中進行作用。
Date of Award2016 Sept 7
Original languageChinese
SupervisorChing-Chun Chang (Supervisor)

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