透過系統性分析泛素特異性胜??二十四的交互作用蛋白質探討其在癌症發展之角色

Abstract

過去報導指出去泛素?可以透過調節一些重要的生理?能之蛋白質來影響包含細胞週期、細胞凋亡、DNA損壞反應等重要的生理?能而在癌症發展中扮演重要的角色。泛素特?性胜??二十四 (Ubiquitin-specific peptidase 24 USP24) 是去泛素?的成員之一。過去對於USP24在癌症中的研究很少，而目前一些初步實驗結果發現USP24參與腫瘤形成及轉移。然而，對於USP24影響癌症的詳細機轉仍不清楚，因此我們想要透過了解與USP24交互作用的蛋白質來推論USP24在癌症發展中的角色。本篇研究目標為利用系統性分析找出潛在會與USP24交互作用的蛋白質，並利用生物資訊軟體分析釣到的標的蛋白質來推測出USP24在癌症發展中所可能影響的?能，最後在癌細胞實驗中證實USP24的?能。首先以USP24為餌利用酵母菌雙雜合系統 (yeast two hybrid) 篩選出超過兩百個蛋白質，將與USP24交互作用的蛋白質做?能上分析後發現篩選出的蛋白質參與在?多重要的生理?能，包括腫瘤、細胞週期調控、DNA損壞反應、細胞凋亡、蛋白質降解等，暗示USP24透過與這些蛋白質交互作用而調控重要生理?能，進而影響癌症發展。過去實驗發現當在細胞內過度表現USP24時會增加細胞凋亡，因此我們想要進一步探討USP24在細胞凋亡的重要性。分析從酵母菌雙雜合系統篩到的蛋白質時，發現Ku70在過去報導中指出會藉由調控Bax而參與細胞凋亡，我們進一步利用免疫沉澱法確認USP24和Ku70及Bax間的交互作用，並且發現USP24會穩定Bax蛋白質而造成表現量增加，進而促使細胞走向凋亡。

Date of Award	2015 Jul 31
Original language	Chinese
Supervisor	Jan-Jong Hung (Supervisor)